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北京六一生物科技有限公司

紫外可見分光光度計的雙向?qū)?shù)光譜法(二)

2015-10-22 類型:新聞資訊
基于零相移濾波器原理,雙向?qū)?shù)光譜法能夠有效地消除相移。

實驗設(shè)備及操作:

   SP-1902紫外可見分光光度計,波長掃描范圍200—1000nm , 光譜帶寬為0.1nm,波長精確度為4-2.0nm且波長的重復(fù)性為1.0nm。(上海光譜儀器有限公司)

   電子天平Sout SL (奧豪斯國際貿(mào)易(上海)有限公司)

   水楊酸和磷酸三鈉 (國藥集團化學(xué)試劑有限公司)

   水楊酸溶液:稱取 0.1g的水楊酸,溶于200mL磷酸鹽緩沖液中,配成O.5g/L的儲備液。再配制40mg/L的水楊酸溶液。用紫外可見分光光度計掃描上述溶液,取磷酸鹽緩沖液為參比,可得232~328nm的吸收光譜。

   水楊酸溶液的紫外可見吸收光譜相對簡單,表明水楊酸在波長260~320nm之間的最大吸收峰在299nm。原始的掃描譜缺少吸收細節(jié),而導(dǎo)數(shù)光譜則能提供更多的吸收信息。因此,用傳統(tǒng)的導(dǎo)數(shù)光譜法和雙向?qū)?shù)光譜法同時對原始吸收數(shù)據(jù)進行處理。

   傳統(tǒng)的一階導(dǎo)數(shù)光譜信號重疊和低頻成分的信號多,圖形相對簡單,分辨率較低,缺少吸收細節(jié)。相反,一次雙向?qū)?shù)光譜在該波長范圍內(nèi)有更多的吸收細節(jié),且消除了低頻成分的影響。雙向?qū)?shù)由兩個一階導(dǎo)數(shù)系統(tǒng)串聯(lián)而成,實際上是一個二階系統(tǒng),因此,雙向?qū)?shù)光譜應(yīng)與傳統(tǒng)的偶數(shù)階導(dǎo)數(shù)光譜相比較。

   雙向?qū)?shù)光譜具有零相移,因此得到的吸收細節(jié)相對原始吸收光譜沒有偏移。一次雙向?qū)?shù)光譜與傳統(tǒng)的二階導(dǎo)數(shù)光譜具有相同的幅值,但傳統(tǒng)的二階導(dǎo)數(shù)在相移的影響下振幅值正負反向,且光譜向右平移了1nm,使得該吸收峰對應(yīng)的波長點變?yōu)?00nrn。二次雙向?qū)?shù)光譜與傳統(tǒng)的四階導(dǎo)數(shù)光譜具有相同的幅值,而后者向右平移了2nm。三次雙向?qū)?shù)光譜與傳統(tǒng)的六階導(dǎo)數(shù)光譜也具有相 同的幅值,但傳統(tǒng)的六階導(dǎo)數(shù)光譜向右平移了3nm。此外,三次雙向?qū)?shù)光譜同樣消除了傳統(tǒng)導(dǎo)數(shù)光譜振幅值的正負反向。

   本文提出了紫外可見分光光度計的雙向?qū)?shù)光譜法。通過對水楊酸溶液的紫外可見分光光度計吸收光譜的分析,認為雙向?qū)?shù)光譜法能有效消除傳統(tǒng)導(dǎo)數(shù)光譜法中的相移,避免了振幅值正負反向以及群時延效應(yīng)帶來的波形畸變和波長位置偏移。因此,雙向?qū)?shù)光譜法能夠提供 更準(zhǔn)確的波長吸收細節(jié),更好地解決紫外可見分光光度計復(fù)雜組分定性、定量分析結(jié)果不理想的難題。

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