雙光束紫外可見分光光度計(jì)，是依據(jù)物質(zhì)在紫外、可見光區(qū)的吸收光譜特性和朗伯—比爾定律的原理，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析的儀器。儀器廣泛應(yīng)用于石油、醫(yī)藥、化工、衛(wèi)生防疫等部門。為確保儀器出具數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，必須經(jīng)過計(jì)量部門的周期檢定，對(duì)使用頻率高、對(duì)儀器技術(shù)指標(biāo)要求高的部門，要經(jīng)常對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。

1、校準(zhǔn)基線：

   儀器使用過程要經(jīng)常進(jìn)行基線校正，對(duì)儀器進(jìn)行各項(xiàng)校準(zhǔn)前一定要校準(zhǔn)基線。不同的儀器操作不同。有的十點(diǎn)“baseline”，有的是點(diǎn)“zero”，還有其他操作方法、

2、基線平直度的測量

   做完“基線校準(zhǔn)”后即測量此項(xiàng)指標(biāo)。要想得出準(zhǔn)確的結(jié)果，條件設(shè)定很關(guān)鍵，選擇雙光速紫外可見分光光度計(jì)的“波長掃描”功能，波長范圍：全波段；帶寬：2nm；掃描速度：中速；縱坐標(biāo)范圍的設(shè)定也很重要，單位選擇“透射比”，可設(shè)定為95%-105%或98%-102%，以便清晰看出100%線的變化。

3、波長準(zhǔn)確度與重復(fù)性的測量：

   目前國際上使用的標(biāo)準(zhǔn)有汞燈、氧化鈥溶液或氧化鈥濾光片，這些標(biāo)準(zhǔn)都有較豐富的光譜峰，選用儀器的“波長掃描”功能，宜用掃描速度慢，響應(yīng)時(shí)間小，這樣可以避免附加誤差。要特別注意“采樣間隔”的設(shè)定，為了準(zhǔn)確得出峰值波長的數(shù)據(jù)，宜采用“0.1nm”，但有的無法設(shè)定“采樣間隔”大部分儀器可以直接設(shè)定所要的“采樣間隔”。

4、透視比準(zhǔn)確度和重復(fù)性的測量：

   操作上使用雙光速紫外可見分光光度計(jì)的“定量測量”功能，用戶使用儀器的該項(xiàng)功能較多，盡量選用“多波長測量”。為保證測量準(zhǔn)確A應(yīng)正確使用該標(biāo)準(zhǔn)溶液：

1、對(duì)測量用吸收池的要求：采用光徑長度為10.00nm的石英池盛裝標(biāo)準(zhǔn)溶液，吸收池的兩透光面應(yīng)無劃痕、油漬或液體污染，否則會(huì)產(chǎn)生一些散射光甚至熒光干擾測量，安裝吸收池至樣品框架上應(yīng)遵循一定的方向，可按吸收池箭頭所標(biāo)方向正對(duì)入射光方向，以減少吸收池兩透光面的不平

行性帶來的誤差。

2、必須事先對(duì)儀器波長進(jìn)行校準(zhǔn)后，才能使用標(biāo)準(zhǔn)溶液測量透射比準(zhǔn)確度。