分光光度計是實(shí)驗室常用的精密儀器，在醫(yī)院中有著廣泛的應(yīng)用，主要用于測量溶液的濃度。分光光度計屬于計量強(qiáng)制檢定項目，檢定周期應(yīng)＜1年。目前的檢定規(guī)程為中華人民共和國國家計量檢定規(guī)程“紫外、可見、近紅外分光光度計檢定規(guī)程”該規(guī)程對自動掃描型儀器的檢定方法描述并不多，有些參數(shù)不可設(shè)置，在此介紹一些檢定技巧。

分光光度計測量原理

   分光光度計的基本測量原理是朗伯-比爾定律，意味著一定波長的單色光通過溶液時溶液對光的吸收度與溶液自身的濃度以及液層的厚度成正比。分光光度計通過光柵或棱鏡來生成不同波長的單色光，通過待測溶液后，檢測出射光的強(qiáng)度，再經(jīng)過信號處理，即可得到溶液的吸光度或透射比。通常需測量其中的一項。由于其分光能力很強(qiáng)，其波長范圍可以達(dá)到數(shù)個nm，甚至更窄，從而提高了分析的靈敏度、準(zhǔn)確度和波長范圍，使得分光光度計在化學(xué)分析中得到廣泛的應(yīng)用。

計量中的常見問題與使用技巧

   波長準(zhǔn)確度的對比設(shè)定值：波長準(zhǔn)確度的測量在規(guī)程中指定了9種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可供選擇。由于濾光片使用方便，價格低廉，成為應(yīng)用最廣泛的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。通常采用氧化鈥濾光片，通過全波段掃描，找到其吸光度出現(xiàn)波谷的波長，然后與給定值進(jìn)行比較，可得到波長示值誤差的數(shù)值。需要說明的是，雖然氧化鈥具有固定的參考波長，但在實(shí)際計算中應(yīng)選用具有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)資格的機(jī)構(gòu)校準(zhǔn)的波長為準(zhǔn)，并應(yīng)定期進(jìn)行校正。

   濾光片標(biāo)號的含義：測量雜散光時，需要用到波長分別為220 nm、360nm和420nm的截止濾光片。截止濾光片上印有編號，編號的數(shù)字×10即為標(biāo)稱測試波長。所以應(yīng)選擇22號、36號和42號截止濾光片。截止濾光片類似于一個高通濾波器，其截止波長應(yīng)分別≥225 nm、365 nm和430nm。同理，干涉濾光片也是以編號數(shù)字×10作為標(biāo)稱峰值波長，中性濾光片以編號數(shù)字×10作為標(biāo)稱透射比。